Методы обработки эякулята
Прежде чем сперму можно будет использовать во вспомогательных репродуктивных технологиях (например, при внутриматочной инсеминации или классическом экстракорпоральном оплодотворении, как отдельно, так и в сочетании с интрацитоплазматической инъекцией сперматозоида (ИКСИ), её необходимо обработать.
В лабораториях репродуктивной медицины используются различные методы очистки спермы, направленные на выделение подвижных, морфологически нормальных и генетически здоровых сперматозоидов.
Метод центрифугирование эякулята в градиенте плотности
Данный метод позволяет отделить сперматозоиды от семенной жидкости и очистить от округлых клеток, лейкоцитов, эритроцитов и других нежелательных клеточных элементов, а также неподвижные или морфологически аномальных сперматозоидов.
Суть метода в том, что эякулят помещается на градиент плотности, после чего образцы подвергаются центрифугированию. Подвижные и морфологически нормальные сперматозоиды оседают и концентрируются в нижней части пробирки.
Метод всплытия «swim-up»
Данный метод основан на способности подвижных сперматозоидов активно перемещаться вверх в жидкой среде, оставляя за собой нежелательные элементы семенной жидкости. Сперму наливают под слой подходящей среды, и после инкубации верхний слой, содержащий наиболее подвижные клетки, аккуратно собирают.
Чаще всего этот метод используют после метода центрифугирования эякулята в градиенте плотности для достижения наилучшего результата.
Метод отбора сперматозоидов при помощи микрожидкостного чипа
Суть этого метода в сортировке сперматозоидов с помощью специального микрофлюидного устройства, или микрожидкостного чипа (микрочипа).
Принцип действия микрофлюидики заключается в разделении сперматозоидов по их подвижности в жидкой среде, сформированной микроканалами или микропорами в мембране микрочипа. Сперматозоиды в чипе сами выплывают из эякулята, имитируя движение в половых путях.
Доплывают к месту отбора материала из чипа только самые активные сперматозоиды, происходит их естественная селекция и выделяется фракция лучших сперматозоидов для их дальнейшего использования при проведении оплодотворения яйцеклеток методами ЭКО, ИКСИ или для внутриматочной инсеминации.
Преимущества метода:
- Физиологичный отбор сперматозоидов без центрифугирования и сильных механических нагрузок
- Минимизация повреждений мембран и фрагментации ДНК сперматозоидов
- Стабильность, воспроизводимость и снижение человеческого фактора
- Потенциальное повышение качества эмбрионов и эффективности программ ЭКО
